Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2"-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 " - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Prevalence, outcomes, and predictors of multidrug-resistant nosocomial lower respiratory tract infections among patients in an ICU / Prevalência, desfechos e preditores de infecções nosocomiais do trato respiratório inferior multirresistentes em pacientes em uma UTI

ABSTRACT Objective: To determine the prevalence, outcomes, and predictors of multidrug-resistant nosocomial lower respiratory tract infections (LRTI) in patients in an ICU. Methods: This was an observational cohort study involving patients with nosocomial LRTI (health care-associated pneumonia, hospital-acquired pneumonia, or ventilator-associated pneumonia). Data were prospectively collected between 2015 and 2019. The multidrug-resistant pathogens (MDRPs) identified in the isolates studied included resistant to extended-spectrum cephalosporin-resistant and carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae, and Pseudomonas aeruginosa, carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, and methicillin-resistant Staphylococcus aureus at microbiological diagnosis. Results: During the study period, 267 patients in the ICU were diagnosed with LRTI, microbiological confirmation of LRTI having been obtained in 237. Of these, 146 (62%) had at least one MDRP isolate. Patients infected with MDRP were found to have poorer outcomes than patients infected with susceptible strains, such as prolonged mechanical ventilation (18.0 days vs. 12.0 days; p < 0.001), prolonged ICU length of stay (23.0 days vs.16.0 days; p < 0.001), and higher mortality (73% vs. 53%; p < 0.001) when compared with patients infected with susceptible strains. Hospital length of stay ≥ 5 days (OR = 3.20; 95% CI: 1.39-7.39; p = 0.005) and prolonged use vasoactive drugs (OR = 3.15; 95% CI: 1.42-7.01; p = 0.004) were independent predictors of LRTI caused by MDRPs (LRTI-MDRP). The presence of LRTI-MDRP was found to be an independent predictor of death (OR = 2.311; 95% CI: 1.091-4.894; p = 0.028). Conclusions: Prolonged use of vasoactive drugs and prolonged hospital length of stay were independent predictors of LRTI-MDRP in this population of critically ill patients with very poor outcomes.

RESUMO Objetivo: Determinar a prevalência, os desfechos e os preditores de infecções do trato respiratório inferior (ITRI) nosocomiais em pacientes em uma UTI. Métodos: Estudo observacional de coorte com pacientes com ITRI nosocomiais (pneumonia associada à assistência à saúde, pneumonia adquirida no hospital ou pneumonia associada à ventilação mecânica). Os dados foram coletados prospectivamente entre 2015 e 2019. Os patógenos multirresistentes (PMR) identificados nos isolados estudados incluíram Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae e Pseudomonas aeruginosa resistentes a cefalosporinas de espectro estendido e carbapenêmicos, enterobactérias resistentes a carbapenêmicos e Staphylococcus aureus resistente à meticilina no diagnóstico microbiológico. Resultados: Durante o período do estudo, 267 pacientes internados na UTI foram diagnosticados com ITRI, 237 dos quais tiveram confirmação microbiológica de ITRI. Destes, 146 (62%) apresentaram pelo menos um isolado de PMR. Os pacientes infectados por PMR tiveram piores desfechos do que os infectados por cepas sensíveis, como ventilação mecânica prolongada (18,0 dias vs. 12,0 dias; p < 0,001), tempo prolongado de internação na UTI (23,0 dias vs. 16,0 dias; p < 0,001) e maior mortalidade (73% vs. 53%; p < 0,001). Tempo de internação hospitalar ≥ 5 dias (OR = 3,20; IC95%: 1,39-7,39; p = 0,005) e uso prolongado de drogas vasoativas (OR = 3,15; IC95%: 1,42-7,01; p = 0,004) foram preditores independentes de ITRI por PMR (ITRI-PMR). A presença de ITRI-PMR foi um preditor independente de óbito (OR = 2,311; IC95%: 1,091-4,894; p = 0,028). Conclusões: O uso prolongado de drogas vasoativas e o tempo prolongado de internação hospitalar foram preditores independentes de ITRI-PMR nesta população de pacientes críticos com desfechos muito ruins.

Multidrug-resistant Salmonella spp. in fecal samples of pigs with suspected salmonellosis in Antioquia, Colombia, 2019-2021 / Salmonella spp. multirresistentes en muestras fecales de cerdos con presunta salmonelosis en Antioquia, Colombia, 2019-2021 / Salmonella spp. multirresistente em amostras fecais de suínos com suspeita de salmonelose em Antioquia, Colômbia, 2019-2021

ABSTRACT Objectives. To determine the proportion of Salmonella enterica in fecal samples of live pigs with suspected salmonellosis analyzed at the diagnostic unit of the University of Antioquia, Colombia between 2019 and 2021, and examine the serotypes and antimicrobial resistance patterns. Methods. This was a laboratory-based cross-sectional study of routine data on fecal samples received from pig farms in all nine subregions of Antioquia state, Colombia. Salmonella spp. detection at the university is done using enrichment, selective culture, and polymerase chain reaction. Serotypes were identified using the Kauffmann-White scheme and isolates were tested for antimicrobial susceptibility using broth microdilution. Results. Of 653 samples tested, 149 (23%) were positive for S. enterica. Nine serotypes were identified. The most common were Salmonella Typhimurium (56%) and its monophasic variant (35%). Resistance to ampicillin (70%) was most frequently observed, followed by ciprofloxacin (55%), and sulfamethoxazole-trimethoprim (52%). No isolates were resistant to amikacin and gentamicin. Multidrug resistance (resistance to ≥ 3 classes of antibiotics) was observed in 61 (44%) isolates. Multidrug resistance was highest in S. Typhimurium (57%) compared with the other serotypes. Serotype was associated with multidrug resistance (p = 0.01), but age of the pig and sub-region were not. Conclusions. The proportion of Salmonella spp. and the associated high levels of multidrug resistance are of concern and may indicate irrational use of antimicrobials and poor management practices in pig production systems in the region. Strengthened surveillance is needed to monitor and improve farm management practices and the use of antimicrobials in farms in Colombia.

RESUMEN Objetivos. Determinar la proporción de Salmonella enterica en muestras fecales de cerdos vivos con presunta salmonelosis analizadas en la unidad de diagnóstico de la Universidad de Antioquia (Colombia) entre el 2019 y el 2021, así como examinar los serotipos y los patrones de resistencia a los antimicrobianos. Métodos. Se trata de un estudio transversal de laboratorio sobre datos ordinarios de muestras fecales provenientes de granjas porcinas de las nueve subregiones del departamento de Antioquia (Colombia). La detección de Salmonella spp. en la universidad se realiza mediante el enriquecimiento, el cultivo selectivo y la reacción en cadena de la polimerasa. Se identificaron los serotipos con el esquema de Kauffmann-White y se examinaron las cepas aisladas para determinar la susceptibilidad antimicrobiana mediante microdilución en caldo. Resultados. De las 653 muestras analizadas, 149 (23%) dieron un resultado positivo para S. enterica. Se identificaron nueve serotipos. Los más comunes fueron Salmonella typhimurium (56%) y su variante monofásica (35%). La resistencia a la ampicilina fue la observada con mayor frecuencia (70%), seguida de la resistencia al ciprofloxacino (55%) y al sulfametoxazol-trimetoprima (52%). Ninguna cepa aislada fue resistente a la amikacina y la gentamicina. Se observó resistencia a múltiples fármacos (resistencia a tres o más clases de antibióticos) en 61 cepas (44%). La resistencia a múltiples fármacos fue más elevada en el caso de S. typhimurium (57%) en comparación con los otros serotipos. Se asoció el serotipo con la resistencia a múltiples fármacos (p = 0,01), a diferencia de la edad del cerdo y la subregión. Conclusiones. La proporción de Salmonella spp. y los elevados niveles asociados de resistencia a múltiples fármacos son preocupantes y pueden ser un indicativo de uso irracional de antimicrobianos y malas prácticas de gestión en los sistemas de producción porcina de la región. Es necesario reforzar la vigilancia para dar seguimiento y mejorar las prácticas de gestión agropecuaria y el uso de antimicrobianos en las granjas en Colombia.

RESUMO Objetivos. Determinar a proporção de Salmonella enterica em amostras de fezes de suínos vivos com suspeita de salmonelose analisadas na unidade de diagnóstico da Universidade de Antioquia, Colômbia, entre 2019 e 2021, e examinar seus sorotipos e padrões de resistência a antimicrobianos. Métodos. Estudo transversal, de base laboratorial, utilizando dados de rotina de amostras de fezes recebidas de suinocultores em todas as nove sub-regiões do estado de Antioquia, Colômbia. A detecção de Salmonella spp. na Universidade é feita por enriquecimento, cultura seletiva e reação em cadeia da polimerase. Os sorotipos foram identificados usando o esquema de Kauffmann-White, e os isolados foram testados quanto à suscetibilidade aos antimicrobianos pelo método de microdiluição em caldo. Resultados. Das 653 amostras testadas, 149 (23%) foram positivas para S. enterica. Foram identificados nove sorotipos. Os mais comuns foram Salmonella Typhimurium (56%) e sua variante monofásica (35%). A resistência à ampicilina (70%) foi observada com maior frequência, seguida pela resistência ao ciprofloxacino (55%) e ao sulfametoxazol/trimetoprima (52%). Nenhum isolado apresentou resistência à amicacina ou gentamicina. Multirresistência (resistência a ≥ 3 classes de antibióticos) foi observada em 61 isolados (44%). A multirresistência foi mais comum em S. Typhimurium (57%), em comparação aos outros sorotipos. Foi constatada associação da multirresistência com sorotipos (p = 0,01), mas não com idade do suíno ou sub-região. Conclusões. A proporção de Salmonella spp. e os níveis elevados associados de multirresistência a antimicrobianos aqui constatados são preocupantes, e podem indicar uso irracional de antimicrobianos e práticas inadequadas de manejo nos sistemas de suinocultura da região. É preciso fortalecer a vigilância para monitorar e melhorar as práticas de manejo agrícola e o uso de antimicrobianos em fazendas na Colômbia.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2’:4’,2”-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-¹ representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ‘: 4’, 2 ” - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-¹ representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg/ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Multiresistant microorganism infection in newborns at an intermediate neonatal care unit and intensive care unit of reference: cross-sectional study / Infecção por microrganismo multirresistente em recém-nascidos na unidade de cuidados intermediários neonatais e unidade de cuidados intensivos de referência: estudo transversal

The objective was to describe the infection profile of multidrug-resistant organisms of newborns (NB), admitted to the neonatal intermediate care unit and the intensive care unit. It was a descriptive cross-sectional study of epidemiological nature, composed of 931 medical records and/or Hospital Infection Control Committee notification records, during the period of June to September 2012. Eight hundred and seventy newborns (NB) were admitted to the neonatal intensive care units and to intermediate care, with a final sample of 45 NB presenting bloodstream infections (BSI) caused by multiresistant microorganisms. From the analyses, the following results were highlighted: gestational age < 37 weeks in 42 (93.3%); low weight at birth between < 750g to 1.499g. The profile for resistance to enterobacteriaceae was 100% for cefepime and ceftazidime concerning non-fermenting gram-negative bacteria, it was found that (100%) of P.aeruginosa was resistant to aztreonam, (100%) of S. maltophilia resistant to ceftazidime and to gentamycin, however, (1.1%) of S. aureus isolates were resistant to oxacillin and (12.5%) of S. haemolyticus demonstrated a confirmed resistance to vancomycin. These results are worrying and express the importance of correct monitoring, and the need for producing a propaedeutic protocol in consensus with the multiprofessional team through the Hospital Infection Control Committee and managers, which is then implemented and regularly assessed by the service.

Objetivou-se descrever a infecção por microorganismo multirresistente em recém-nascidos na unidade de cuidados intermediários neonatais e unidade de cuidados intensivos de referência. Tratou-se de estudo transversal de natureza epidemiológica, composto por 931 fichas e/ou prontuários de notificação da Comissão de Controle de Infecção Hospitalar (CCIH), no período junho a setembro de 2012. Foram 870 recém-nascidos (RN), admitidos nas unidades de terapia intensiva neonatal e de cuidados intermediários, como amostra final 45 RN apresentaram infecção de corrente sanguínea por microorganismo multirresistente. Dessas análises destacam-se os resultados: idade gestacional < 37 semanas em 42 (93,3%); baixo peso ao nascer entre < 750g a 1.499g. O perfil de resistência à enterobactérias foi de 100% para o cefepime e ceftazidime, e para as bactérias gram-negativas não fermentadoras, verificou-se que (100%) da P.aeruginosa era resistente ao aztreonam, (100%) de S.maltophilia resistente à ceftazidima e à gentamicina; Entretanto, (1,1%) dos isolados de S. aureus eram resistentes à oxacilina e (12,5%) de S. haemolyticus conferiu resistência à vancomicina. Esses resultados são preocupantes e demonstram a relevância do monitoramento, propondo a elaboração de protocolo propedêutico em consenso com a equipe multiprofissional, com a CCIH e gestores a ser implementado e avaliado, regularmente pelo serviço.

mcr-1-carrying Enterobacteriaceae isolated from companion animals in Brazil / Enterobacteriaceae portadora de mcr-1 em isolados clínicos de animais de companhia: primeiro relato no Brasil

Plasmid-mediated polymyxin resistance was first described in 2015, in China, in Escherichia coli carrying the mcr-1 (Mobile Colistin Resistance-1) gene. Since then, it has become a major public health challenge worldwide, representing a major threat to human and animal health. In addition, there are still few reports on the prevalence of mcr-1 in Enterobacteriaceae isolated from humans, animals and food. Therefore, the purpose of the study was to investigate the occurrence of the mcr-1 gene in bacterial isolates with phenotypic resistance to polymyxin B obtained from clinical specimens of companion animals. Phenotypic resistance to polymyxin B were determined by broth microdilution and the susceptibility profile to other antimicrobials (amikacin, amoxicillin/clavulanate, ampicillin, ampicillin/sulbactam, aztreonam, cefazolin, cefepime, cefotaxime, cefoxitin, ceftazidime, ceftriaxone, chloramphenicol, ciprofloxacin, doxycycline, ertapenem, gentamicin, imipenem, marbofloxacin, meropenem, phosphomycin, piperacillin/tazobactam, tetracycline, ticarcillin/clavulanate, tobramycin and trimethoprim/sulfamethoxazole) by disc-diffusion agar method. The extraction of bacterial DNA was performed via heat shock followed by spectrophotometric evaluation. To verify the presence of mcr-1, the Polymerase Chain Reaction was employed using specific primers, followed by agarose gel electrophoresis. The positive isolates had the corresponding amplicons sequenced. In this study, there were identified the first isolates of Escherichia coli, Klebsiella spp. and Enterobacter spp. carrying the mcr-1 gene derived from specimens of companion animals in Brazil. Our results suggest the dissemination of resistance to polymyxins in the community and the environment, highlighting the need for surveillance and optimized treatment guidelines.(AU)

A resistência à polimixina mediada por plasmídeo teve sua primeira descrição em 2015, na China, em Escherichia coli portadora do gene mcr-1 (Mobile Colistin Resistance-1) e a partir de então tornou-se um grande desafio para a saúde pública em todo o mundo, constituindo uma grande ameaça à saúde humana e animal. Além disso, ainda existem poucos relatos sobre a prevalência de mcr-1 em Enterobacteriaceae isoladas de humanos, animais e alimentos. Sendo assim, o objetivo do estudo foi investigar a ocorrência do gene mcr-1 em isolados bacterianos com resistência fenotípica à polimixina B, oriundos de materiais clínicos de animais de companhia. A resistência fenotípica à polimixina B foi determinada por microdiluição em caldo e o perfil de sensibilidade aos demais antimicrobianos (amicacina, amoxicilina/clavulanato, ampicilina, ampicilina/sulbactam, aztreonam, cefazolina, cefepime, cefotaxima, cefoxitina, ceftazidima, ceftriaxona, cloranfenicol, ciprofloxacina, doxiciclina, ertapenem, gentamicina, imipinem, marbofloxacino, meropenem, fosfomicina, piperacilina/tazobactam, tetraciclina, ticarcilina/clavulanato, tobramicina sulfametoxazol/trimetoprim) foram determinados pelo método disco difusão. A extração do DNA bacteriano foi realizada via choque térmico, seguido de avaliação espectrofotométrica. Para a verificação da presença do mcr-1 foi utilizada a Reação em Cadeia da Polimerase com emprego de iniciadores específicos, seguida de eletroforese em gel de agarose. Os isolados positivos tiveram os correspondentes amplicons sequenciados. Nesse estudo foram identificados os primeiros isolados de Escherichia coli, Klebsiella spp. e Enterobacter spp. portadores do gene mcr-1 derivados de espécimes de animais de companhia no Brasil. Este estudo sugere a disseminação da resistência às polimixinas na comunidade e no meio ambiente, destacando a necessidade de vigilância e diretrizes otimizadas de tratamento.(AU)

Aspectos associados à drogarresistência em pessoas com Tuberculose/HIV: revisão integrativa / Aspectos relacionados con la drogorresistencia en personas con tuberculosis/VIH: revisión integradora / Aspects associated with drug resistance in people with tuberculosis/HIV: an integrative review

Resumo Objetivo: Analisar as produções científicas acerca dos aspectos associados à drogarresistência em pessoas com coinfecção Tuberculose/HIV. Métodos: Revisão integrativa de literatura, realizada nas bases de dados CINAHL, LILACS, SciELO, Web of Science, SCOPUS, MEDLINE e COCHRANE. Utilizaram-se dos descritores HIV, Tuberculose e Resistência a múltiplos medicamentos, em português, inglês e espanhol. Encontraram-se 1.177 artigos e selecionaram-se 19, excluíram-se 1.158, 41 duplicados e 1.117, por não atenderem à pergunta de pesquisa e abordarem outras temáticas, como: coinfecção do HIV e pneumonia; impacto da multirresistência na vida de pessoas com coinfecção, destacando-se a mortalidade; testes diagnósticos de multirresistência aos fármacos; e associação entre HIV e tuberculose meníngea. Resultados: Os dados obtidos foram organizados em três categorias temáticas: Aspectos clínicos, destacando-se: infecção pelo HIV, hipoalbuminemia, carga elevada do bacilo; Aspectos relacionados aos fármacos, incluindo abandono do tratamento, não adesão à terapia, tratamento prévio para tuberculose, má absorção de medicamentos, efeitos adversos causados pela terapia antirretroviral, interação entre os tratamentos de ambas as infecções; e Aspectos sociais, sinalizando-se hospitalizações, convivência com outras pessoas com bacilos multirresistentes, privação de liberdade, atraso no diagnóstico e início tardio do tratamento. Conclusão: Os principais aspectos identificados foram o abandono da terapêutica, tratamento prévio para tuberculose e intervenção inadequada, tais resultados, também, podem estender-se às pessoas que não apresentam coinfecção. Enfatiza-se a importância desta revisão para instigar novas pesquisas, com destaque para estratégias com foco na identificação precoce de pessoas com multirresistência, prevenção e incentivo à adesão ao tratamento.

Resumen Objetivo: Analizar las producciones científicas sobre los aspectos relacionados con la drogorresistencia en personas con coinfección tuberculosis/VIH. Métodos: Revisión integradora de literatura, realizada en las bases de datos CINAHL, LILACS, SciELO, Web of Science, SCOPUS, MEDLINE y COCHRANE. Se utilizaron los descriptores VIH, tuberculosis y resistencia a múltiples medicamentos, en portugués, inglés y español. Se encontraron 1.177 artículos, de los que se seleccionaron 19 y se excluyeron 1.158, 41 duplicados y 1.117 por no abordar la pregunta de la investigación y tratar otros temas, como: coinfección de VIH y neumonía; impacto de la multirresistencia en la vida de personas con coinfección, con énfasis en la mortalidad; pruebas diagnósticas de multirresistencia a los fármacos, y relación entre VIH y tuberculosis meníngea. Resultados: Los datos obtenidos fueron organizados en tres categorías temáticas: aspectos clínicos, con énfasis en: infección por VIH, hipoalbuminemia, carga del bacilo elevada; aspectos relacionados con los fármacos, como abandono del tratamiento, no adherencia al tratamiento, tratamiento previo para tuberculosis, mala absorción de medicamentos, efectos adversos causados por el tratamiento antirretroviral, interacción entre los tratamientos de ambas infecciones; y aspectos sociales, con foco en internaciones, convivencia con otras personas con bacilos multirresistentes, privación de la libertad, retraso en el diagnóstico e inicio tardío del tratamiento. Conclusión: Los principales aspectos identificados fueron el abandono del tratamiento, el tratamiento previo para tuberculosis y la intervención inadecuada. Estos resultados también pueden extenderse a las personas que no presentan coinfección. Se resalta la importancia de esta revisión para estimular nuevas investigaciones, con énfasis en estrategias centradas en la identificación temprana de personas con multirresistencia, prevención e incentivo para adherir al tratamiento.

Abstract Objective: To analyze scientific productions on aspects associated with drug resistance in people with tuberculosis (TB)/HIV coinfection. Methods: Integrative literature review performed in the CINAHL, LILACS, SciELO, Web of Science, SCOPUS, MEDLINE and COCHRANE databases. The following descriptors were used in Portuguese, English and Spanish: HIV, Tuberculosis and Multidrug resistance. In total, 1,177 articles were found and 19 were selected; 1,158 were excluded, of which 41 were duplicates and 1,117 did not answer the research question and addressed other topics, namely: HIV and pneumonia coinfection; impact of multidrug resistance on the lives of people with coinfection, with emphasis on mortality; diagnostic tests for multidrug resistance; and association between HIV and meningeal tuberculosis. Results: Data were organized into three thematic categories, as follows: Clinical aspects, highlighting: HIV infection, hypoalbuminemia, elevated bacillus load; drug-related aspects, including treatment abandonment, non-adherence to therapy, previous treatment for tuberculosis, drug malabsorption, adverse effects caused by antiretroviral therapy, interaction between treatments for both infections; and social aspects, including hospitalizations, living with other people with multidrug-resistant bacilli, deprivation of liberty, delayed diagnosis and late start of treatment. Conclusion: The main aspects identified were abandonment of therapy, previous treatment for tuberculosis and inadequate intervention, and these results may also extend to people who do not have coinfection. This review is important to instigate new research, with emphasis on strategies focused on the early identification of people with multidrug resistance, prevention and encouragement of adherence to treatment.

Epidemiologia global de pacientes com tuberculose multidrogarresistente (MDR-TB) e extensivamente resistente (XDR-TB) / Global epidemiology of patients with multidrugresistant tuberculosis (MDR-TB) and extensively drug-resistant tuberculosis (XDR-TB)

A tuberculose multidrogarresistente (MDR-TB) e a tuberculose extensivamente resistente (XDR-TB), levantam preocupações pelo grande número de casos, especialmente na África, Ásia e Europa, e pela taxa de sucesso ainda baixa no tratamento, atingindo 54% para MDR-TB e 30% para XDR-TB. O objetivo do presente estudo é relatar as diferentes realidades epidemiológicas dos doentes com MDR-TB e XDR-TB em diferentes partes do mundo. Foram revisados artigos da última década nas bases científicas disponíveis. Os estudos mostraram que a maioria das pessoas afetadas pela MDR-TB são do sexo masculino, migrantes ou imigrantes, que já haviam sido tratados anteriormente. Descrevemos que o tratamento da tuberculose (TB) usualmente resulta em cura, mas também pode levar à seleção dos bacilos mais resistentes. Mostramos que o surgimento de cepas resistentes na TB se deve ao tratamento inadequado de formas mais simples de TB, com cepas resultantes de manejo difícil e que as populações vulneráveis são as mais afetadas. Salientamos que o abandono do tratamento é fator que comumente origina esse problema complexo da doença e elencamos os genes de resistência mais estudados. (AU)

Multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB) and extensively drug-resistant tuberculosis (XDR-TB) raise concerns for their great number of cases, especially in Africa, Asia and Europe, and for their still low treatment success rate, reaching 54% for MDR-TB and 30% for XDR-TB. The objective of this study is to report the epidemiological situation of patients with MDR-TB and XDR-TB in different parts of the world. Articles published in the last decade were collected from available scientific databases and reviewed. The studies showed that most of those affected by MDR-TB are male, migrants or immigrants, and had been previously treated for tuberculosis (TB). We report that TB treatment usually ends in cure, but may also lead to selection of the most resistant bacilli. We show that the emergence of resistant strains in TB is due to inappropriate treatment of simpler forms of TB, resulting in strains of difficult management, and that the most vulnerable populations are the most affected. We emphasize that treatment dropout is the factor most commonly associated with this complicated issue, and also list the most studied multidrug resistance genes. (AU)

Evaluation of the impact that the changes in tuberculosis treatment implemented in Brazil in 2009 have had on disease control in the country / Avaliação do impacto das mudanças do tratamento da tuberculose implantadas em 2009 no controle da tuberculose pulmonar no Brasil

ABSTRACT Objective: To analyze the impact that the 2009 changes in tuberculosis treatment in Brazil had on the rates of cure, tuberculosis recurrence, mortality, treatment abandonment, and multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB). Methods: An ordinary least squares regression model was used in order to perform an interrupted time series analysis of secondary data collected from the Brazilian Tuberculosis Case Registry Database for the period between January of 2003 and December of 2014. Results: The 2009 changes in tuberculosis treatment in Brazil were found to have no association with reductions in the total number of cases (β = 2.17; 95% CI: −3.80 to 8.14; p = 0.47) and in the number of new cases (β = −0.97; 95% CI: −5.89 to 3.94; p = 0.70), as well as having no association with treatment abandonment rates (β = 0.40; 95% CI: −1.12 to 1.93; p = 0.60). The changes in tuberculosis treatment also showed a trend toward an association with decreased cure rates (β = −4.14; 95% CI: −8.63 to 0.34; p = 0.07), as well as an association with increased mortality from pulmonary tuberculosis (β = 0.77; 95% CI: 0.16 to 1.38; p = 0.01). Although there was a significant increase in MDR-TB before and after the changes (p < 0.0001), there was no association between the intervention (i.e., the changes in tuberculosis treatment) and the increase in MDR-TB cases. Conclusions: The changes in tuberculosis treatment were unable to contain the decrease in cure rates, the increase in treatment abandonment rates, and the increase in MDR-TB rates, being associated with increased mortality from pulmonary tuberculosis during the study period. Keywords: Tuberculosis, pulmonary/epidemiology; Tuberculosis, pulmonary/drug therapy; Tuberculosis, pulmonary/mortality; Interrupted time series analysis; Drug resistance, multiple; Drug compounding.

RESUMO Objetivo: Analisar o impacto das mudanças do tratamento da tuberculose implantadas no Brasil em 2009 no número de casos de cura, de recidiva, de óbitos, de abandono e de tuberculose multirresistente (TBMR). Métodos: Foi realizada uma análise de séries temporais interrompida utilizando o modelo de regressão pelo método dos mínimos quadrados ordinários a partir de dados secundários coletados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação da Tuberculose entre janeiro de 2003 e dezembro de 2014. Resultados: A análise mostrou independência entre as mudanças do tratamento e a redução do número total de casos (β = 2,17; IC95%: −3,80 a 8,14; 189 p = 0,47), a redução do número de novos casos (β = −0,97; IC95%: −5,89 a 3,94; p =190 0,70) e do abandono do tratamento (β = 0,40; IC95%: 199 −1,12 a 1,93; p = 0,60). Demonstrou ainda tendência à associação com a diminuição da cura (β = −4,14; IC95%: −8,63 a 0,34; p = 0,07) e associação com aumento da mortalidade por tuberculose pulmonar (β = 0,77; IC95%: 0,16 a 1,38; p = 0,01). A TBMR aumentou significativamente tanto no período anterior quanto no período posterior às mudanças do tratamento (p < 0,0001), embora de forma independente da intervenção (β = 0,13; IC95%: −0,03 a 0,29; p = 0,12). Conclusões: As mudanças no tratamento não impediram nem a diminuição na taxa de cura e nem o aumento do abandono e da TBMR; por outro lado, se associaram ao aumento de óbitos por tuberculose pulmonar durante o período do estudo.

Perfil de resistência de Mycobacterium tuberculosis no estado de Mato Grosso do Sul, 2000-2006 / Drug resistance profile of Mycobacterium tuberculosis in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil, 2000-2006

OBJETIVO: Determinar o perfil de resistência a drogas de Mycobacterium tuberculosis no estado de Mato Grosso do Sul no período entre 2000 e 2006. MÉTODOS: Estudo descritivo de casos notificados de tuberculose no Sistema de Informação de Agravos de Notificação, com cultura positiva para M. tuberculosis e testes de sensibilidade a rifampicina, isoniazida, estreptomicina e etambutol. Para as culturas, utilizaram-se os meios sólidos Lõwenstein-Jensen e Ogawa-Kudoh, assim como um sistema automatizado com meio líquido; para os testes de sensibilidade, o método das proporções. RESULTADOS: De 783 casos, 69,7 por cento eram de pacientes masculinos, na faixa etária de 20-49 anos (70 por cento), com forma pulmonar (94,4 por cento) e sorologia positiva para HIV (8,6 por cento); 645 (82,4 por cento) eram casos novos, e 138 (17,6 por cento) eram casos tratados. Identificou-se qualquer resistência em 143 casos (18,3 por cento). A taxa de resistência primária (RP) foi, respectivamente, 8,1 por cento, 1,6 por cento, 2,8 por cento e 12,4 por cento, para monorresistência, multirresistência (MR), outros padrões de associação de drogas e qualquer resistência, ao passo que a taxa de resistência adquirida (RA) foi, respectivamente, 14,5 por cento, 20,3 por cento, 10,9 por cento e 45,7 por cento, e a taxa de resistência combinada (RC) foi, respectivamente, 9,2 por cento, 4,9 por cento, 4,2 por cento e 18,3 por cento. A estreptomicina foi a droga mais comum na RP (3,4 por cento), e a isoniazida foi a mais comum na RA e RC (7,2 por cento e 3,7 por cento, respectivamente). CONCLUSÕES: Os níveis de resistência são elevados, prejudicando o controle da tuberculose em Mato Grosso do Sul. A MR adquirida, 12,7 vezes superior à MR primária, evidencia o uso prévio de medicamentos como indicativo de resistência. Os níveis refletem a fragilidade da atenção ao doente, mostrando a importância do tratamento diretamente observado, assim como das culturas e testes de sensibilidade ...

OBJECTIVE: To determine the drug resistance profile of Mycobacterium tuberculosis in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil, between 2000 and 2006. METHODS: Descriptive study of reported tuberculosis cases in the Brazilian Case Registry Database. We included only those cases in which M. tuberculosis culture was positive and sensitivity to drugs (rifampicin, isoniazid, streptomycin and ethambutol) was tested. Lõwenstein-Jensen and Ogawa-Kudoh solid media were used for cultures, as was an automated liquid medium system. Sensitivity tests were based on the proportion method. RESULTS: Among the 783 cases evaluated, males predominated (69.7 percent), as did patients in the 20-49 year age bracket (70 percent), a diagnosis of pulmonary tuberculosis (94.4 percent) and positive HIV serology (8.6 percent); 645 (82.4 percent) were new cases, and 138 (17.6 percent) had previously been treated. Resistance to at least one drug was found in 143 cases (18.3 percent). The primary resistance (PR) rate was, respectively, 8.1 percent, 1.6 percent, 2.8 percent and 12.4 percent, for monoresistance, multidrug resistance (MDR), other patterns of resistance and resistance to at least one drug, whereas the acquired resistance (AR) rate was 14.5 percent, 20.3 percent, 10.9 percent and 45.7 percent, respectively, and the combined resistance (CR) rate was 9.2 percent, 4.9 percent, 4.2 percent and 18.3 percent, respectively. In PR, streptomycin was the most common drug, whereas isoniazid was the most common in AR and CR (7.2 percent and 3.7 percent, respectively). CONCLUSIONS: These high levels of resistance undermine the efforts for tuberculosis control in Mato Grosso do Sul. Acquired MDR was 12.7 times more common than was primary MDR, demonstrating that the previous use of drug therapy is an indicator of resistance. These levels reflect the poor quality of the health care provided to these patients, showing the importance of using the directly observed treatment, ...

Resistência do Mycobacterium tuberculosis à isoniazida por mutações em duas regiões diferentes do gene katG / Isoniazid-resistant Mycobacterium tuberculosis strains arising from mutations in two different regions of the katG gene

OBJETIVO: Analisar e comparar as mutações em duas regiões diferentes do gene katG, responsáveis pela resistência à isoniazida (INH). MÉTODOS: As análises foram feitas em 97 cepas de Mycobacterium tuberculosis multirresistentes isoladas de culturas de escarro provenientes do Centro de Referência Professor Hélio Fraga. Outras 6 cepas, sensíveis à INH, não apresentaram mutações e foram incluídas como controle. Duas regiões do gene katG (GenBank nº de acesso U06258) - região 1, do códon 1 até o códon 119, e região 2, do códon 267 até o códon 504 - foram amplificadas por PCR e sequenciadas para a identificação das mutações. RESULTADOS: Sete cepas eram resistentes à INH e não mostraram mutação nas duas regiões. Trinta cepas apresentaram mutações na região 1, que se caracterizou por um grande número de deleções, especialmente no códon 4 (24 cepas). A região 2 mostrou 83 mutações pontuais, principalmente no códon 315, com 73 casos de troca de serina (AGC) para treonina (ACC). A análise da região 2 permitiu o diagnóstico de resistência à INH em 81,4 por cento das cepas. Nove cepas tiveram mutações somente na região 1, e isso permitiu o aumento de identificação de cepas resistentes à INH para 90,6 por cento. CONCLUSÕES: O número de mutações do códon 315 foi elevado, compatível com os casos descritos no Brasil e em outros países, e a análise da região 1 aumentou a detecção de mutações em mais 9,2 por cento.

OBJECTIVE: To analyze and compare the mutations in two different regions of the katG gene, which is responsible for isoniazid (INH) resistance. METHODS: We analyzed 97 multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis strains isolated in cultures of sputum samples obtained from the Professor Hélio Fraga Referral Center, in Brasília, Brazil. Another 6 INH-sensitive strains did not present mutations and were included as controls. We used PCR to amplify two regions of the katG gene (GenBank accession no. U06258)-region 1, (from codon 1 to codon 119) and region 2 (from codon 267 to codon 504)-which were then sequenced in order to identify mutations. RESULTS: Seven strains were resistant to INH and did not contain mutations in either region. Thirty strains carried mutations in region 1, which was characterized by a high number of deletions, especially at codon 4 (24 strains). Region 2 carried 83 point mutations, especially at codon 315, and there was a serine-to-threonine (AGC-to-ACC) substitution in 73 of those cases. The analysis of region 2 allowed INH resistance to be diagnosed in 81.4 percent of the strains. Nine strains had mutations exclusively in region 1, which allowed the proportion of INH-resistant strains identified to be increased to 90.6 percent. CONCLUSIONS: The number of mutations at codon 315 was high, which is consistent with cases described in Brazil and in other countries, and the analysis of region 1 resulted in a 9.2 percent increase in the rate at which mutations were identified.

Doença pulmonar por Mycobacterium tuberculosis e micobactérias não-tuberculosas entre pacientes recém-diagnosticados como HIV positivos em Moçambique, África / Mycobacterium tuberculosis and nontuberculous mycobacterial isolates among patients with recent HIV infection in Mozambique

OBJECTIVE: Mycobacteriosis is frequently diagnosed among HIV-infected patients. In Mozambique, where few patients are under antiretroviral therapy and the prevalence of tuberculosis is high, there is need for better characterization of mycobacteria at the species level, as well as for the identification of patterns of resistance to antituberculous drugs. METHODS: We studied a sample of 503 HIV-infected individuals suspected of having pulmonary tuberculosis. Of those 503, 320 tested positive for mycobacteria through sputum smear microscopy or culture of bronchoalveolar lavage fluid. RESULTS: Acid-fast bacilli were observed in the sputum of 73 percent of the individuals presenting positive cultures. Of 277 isolates tested, only 3 were nontuberculous mycobacteria: 2 were identified as Mycobacterium avium and one was identified as M. simiae. Strains initially characterized as M. tuberculosis complex through polymerase chain reaction restriction analysis (PRA) of the hsp65 gene were later confirmed as such through PRA of the gyrB gene. Among the M. tuberculosis isolates, resistance patterns were as follows: to isoniazid, 14 percent; to rifampin, 6 percent; and multidrug resistance, 5 percent. Previously treated cases showed significantly higher rates of resistance to first-line antituberculous drugs. The most common radiological pattern was interstitial infiltrate (in 67 percent), followed by mediastinal lymph node enlargement (in 30 percent), bronchiectasis (in 28 percent), miliary nodules (in 18 percent) and cavitation (in 12 percent). Patients infected with nontuberculous mycobacteria presented clinical profiles indistinguishable from those of other patients. The median CD4 lymphocyte count in this group was 134 cells/mm³. CONCLUSIONS: There is a strong association between tuberculosis and AIDS in Mozambique, as expected in a country with a high prevalence of tuberculosis. Although drug resistance rates are high, the isoniazid-rifampin...

OBJETIVO: A micobacteriose é frequentemente diagnosticada entre pacientes infectados pelo HIV. Em Moçambique, onde apenas um pequeno número de pacientes encontra-se sob tratamento anti-retroviral, e a tuberculose tem alta prevalência, existe a necessidade de melhor caracterização destes agentes bacterianos, em nível de espécie, bem como de se caracterizar os padrões de resistência às drogas antituberculosas. MÉTODOS: Em uma coorte de 503 indivíduos HIV positivos suspeitos de tuberculose pulmonar, 320 apresentaram positividade para baciloscopia ou cultura no escarro e no lavado brônquico. RESULTADOS: Bacilos álcool-ácido resistentes foram detectados no escarro em 73 por cento dos casos com cultura positiva. De 277 isolados em cultura, apenas 3 mostraram-se tratar de micobactérias não-tuberculosas: 2 Mycobacterium avium e uma M. simiae. Todos os isolados de M. tuberculosis inicialmente caracterizados através de reação em cadeia de polimerase (RCP) do gene hsp65 foram posteriormente caracterizados como tal através de RCP do gene gyrB. Resistência à isoniazida foi encontrada em 14 por cento dos casos; à rifampicina em 6 por cento; e multirresistência em 5 por cento. Pacientes previamente tratados para tuberculose mostraram tendência a taxas maiores de resistência às drogas de primeira linha. O padrão radiológico mais freqüente encontrado foi o infiltrado intersticial (67 por cento), seguido da presença de linfonodos mediastinais (30 por cento), bronquiectasias (28 por cento), padrão miliar (18 por cento) e cavidades (12 por cento). Os pacientes infectados por micobactérias não-tuberculosas não apresentaram manifestações clínicas distintas das apresentadas pelos outros pacientes. A mediana de linfócitos CD4 entre todos os pacientes foi de 134 células/mm³. CONCLUSÕES: Tuberculose e AIDS em Moçambique estão fortemente associadas, como é de se esperar em países com alta prevalência de tuberculose. Embora as taxas de resistência a drogas sejam...